粗 脂肪 含 量是 糧食、油 料、飼 料等產 品 標準中 重 要 質 量指 標,是 評 價 產 品 品 質,組 織 生 產 的 重 要依據 之 一。國 內 外測定粗脂肪含 量方 法有 十余 種 之 多,索 氏 抽 提法是 自 前應用最 廣 泛 測 定 方法,是 公 認的脂肪 含量 測 定 的 經 典方法。
在實際 工 作 中,此 法 存在 的 問 題主 要 是 抽提時間 過長 和抽提結 束后抽提瓶 不 易恒 重。圍繞 這些問 題,對抽 提 過 程 和 抽 提 前 后采用的 處理 手 段 進 行改 進,以 國 標 方法 為參 照,熱 浸 提 一 油重法 和 殘 余 法 為改進 方 法,對 照 比 較 這 三 種 檢 測方 法 的 測 定結 果。
1方法 原 理經 典 索氏 提取法 測 定 脂 肪 是 將 樣 品 放 在抽提 筒 內,以水 浴 蒸 餾 冷 凝 的 乙 醚 進 行 回 流 浸 提,一 般 要十 幾 小 時。熱浸 提 一 油 重 法 由 于 樣 品處于 高 溫 溶劑 中,分 子運 動 加快, 使脂肪 浸出 速 度 加 快,因 而 大 大 地縮 短 浸提時間,從 而 加快 測定 速度,一 般 完 成樣 品的 整個提 取 過程 不 到 2 小 時。鋁杯代 替 玻 璃 瓶,電 熱 板 代替 水 浴 加 熱,抽 提杯 容 易恒重,而 且抽 提杯 不 易 被 污 染,操 作簡單容 易。殘余法 不 同 之處 在 于采 用抽 提 過 脂肪的 殘 余 物質 量 計算脂肪 含 量,較以前的殘渣 法 改 進 之 處 在 于 不 需恒 重 紙 袋 質量,在 電 子天 平 上 稱出試 樣 質 量,抽 提 前 后 樣 品質 量差 為 浸 出 脂 肪 量。測得結果為 原 樣 脂 肪含 量,不 是 干基 脂 肪 含 量,與 國 標 法測得結果一 致。
2檢測方 法
.2 1 試 劑
分 析 純 無 水 乙 醚或 沸 程 為 3 0`6 0 石 油 醚。
.2 2儀 器
索 氏 脂 肪 提 取 器;SZC-101型 脂肪測 定 儀; 電子 天平
2 .3式樣制
備選 取 具 有 代 表性 樣 品 2 0 09,粉碎后 全 部 通 過 6 0 目 篩,裝于 密 封容 器 中,防 止 試樣 成分 變 化。
2.4
分 析 步驟
2 . 4 1 國 標 法
按G B/ T 5 5 1 2食 品 中脂 肪 測 定方 法 或G B / T 6 4 3 3飼 料粗脂 肪 測 定 方 法 進 行 檢 測。為使抽 提 終 點 有 一 量 化概 念,消除 不 同人員 目 測產 生 差 異,同時 避免 檢 查抽提終 點 時 乙 醚大量 揮 發 損 害檢驗人 員 健 康。采取 同 時 平 行 測 定6 個 樣 品 8小時后取 出 一 個抽 提 瓶,以 后每隔 2 小 時 取 出 一 個,直 到樣品 脂肪 含 量不再 增 加 為 止。測出 不同 類 別 樣 品 需 要 的 抽 提時間,可 作為 日 常 工 作 參照,也 是改進 法實 驗條 件 確定 依據之 一。部 分 樣 品測 定 脂 肪 需要的 抽 提時 間 見 表1
2 . 4 2 熱 浸 提一 油 重 法
稱樣l 一 5 9( M ) 于 濾 紙筒 中, 烘 干 ,把 濾 紙 筒放 到 脂 肪 測定 儀中。鋁 杯 在1 0 5 ℃ 士 2 ℃ 條 件 下 恒 重 (M )I,放到儀 器加熱板 上, 壓 下儀 器連 接手 柄 ,使 鋁 杯與 回 流 器 緊 密 連 接,從加液孔 加 入 乙 醚 8 0 m l,接通冷凝水。
視 脂 肪 含 量 設 定儀 器 條 件為:加 熱 溫 度 1 35 ℃,時 間:浸 提 3 0 面n 一9 0m in,淋 洗3 0 i mn,試 劑 回 收 1 0m i n,蒸干5 m i o n取 下 鋁 杯,1 0 5 ℃ 士 2 ℃烘 箱中 干 燥 3 0 而 n,在 干 燥 器 中 冷 卻, 稱重( M o z ) 脂肪 含 量 =( M2 一M， ) X10 0 /M. 2 .4 3 殘 渣 法稱 取式樣2 9( M )( 準 確 至·. 0 0 0 0 2 9 ),用 濾 紙 包 好,1 0 5 ℃ 士 2 ℃ 烘箱中干燥 3 h 取 出,在 干 燥 器 中冷 卻,稱重(M ) I。將 樣包裝 入 索 氏 脂肪 抽 提 器抽提筒中,再倒 入 無 水 乙醚,乙 醚 高度為完 全 浸 泡 樣 包,連 接 好儀 器 各部分,浸 泡 至 少1 6h。將浸 泡 后 無 水 乙 醚放 入抽提 瓶中, 在 抽提瓶中放入 兒粒玻 璃球,然后, 抽提 筒中 重 新倒 入無 水 乙 醚 使 之 完 全 浸泡樣包,連接好 儀 器 各部 分,接通 冷凝水,在 6 0 ℃一7 5 ℃ 水浴 上加熱,使 乙 醚 回 流,控 制 乙 醚回 流次 數為 每小 時 8 次。一 般 抽 提6 h 一 s h。抽 提 完 畢,取出樣 包,置 樣 包于通 風處 使 乙 醚揮發。將樣 包放入1 0 5 ℃ 士 2 ℃ 烘箱 中 干 燥 Z h,取 出,在干燥 器中 冷卻,稱 重 ( MZ ) 。脂 肪 含 量=( Ml 一M 勻 Xl o o/ M
3結 果 分 析
( 1 ) 樣 品選取 脂肪 含 量 高 的 花 生、脂 肪 含 量 中等的魚 粉和 脂 肪含 量 較 低的 玉 米,采 用 熱 浸提 一 油 重 法 和殘渣法分 別測定,結 果重 復 性見 表2。從 表2 數 據看 出,兩 種測 定 方法重 現性都較好。
( 2 ) 選取 一 組 樣 品 分別 用 三 種方法測 定 樣 品 脂 肪 含 量,
取5 次測 定結果平 均 值為 最 終結 果進 行 比較,數據 見 表o 3兩 種 測 定結果 與 國 標法相 比,無顯 著 性差異 ( P> . 0 0 5 )。
(3 ) 為 確 定 兩種檢測 方 法的有效性和 可比 性,與 其它 實驗 室 測定結果進行 比 較,結果 見 表 4 o 絕對 差 均 小于 . 0 5 %,相 對偏 差 最高為3.6 %,符合 標準G B/ T 6 4 3 3一 19 9 4、G B / T5 5 1- - 2 8 5 不同實 驗 室 間 重 復 性 要求。
4結論
( 1 )國 標 法、熱 浸 提 一 油 重 法和 殘 余法均具有 良好 重 現性和 準確度,說明 兩 種 改進方法 測 定結果準 確 可 靠,一 定條件 下 三 種方 法可 以相 互 代替使 用。
( 2 ) 熱浸提 一 油 重 法優 勢在 于 利 用 脂 肪 測 定 儀 使試樣浸 入 沸 騰的 溶 劑 中, 使脂肪迅 速 進 入 溶劑中。所 以樣 品不 同只 需 改 變 浸 提 時間,淋洗時 間改 變沒 有 浸 提 時 間 改變 影 響大。3 0m i n淋洗 時間 足 以 使 脂肪 完全 洗脫。
( 3 ) 殘余 法浸泡 時 間 可 利 用 晚 上 時 間,由 于 不 加熱 回流,不必 守護,不 占 用 工 作 日。回 流時 間 可 參 照 表1 進 行 調整。外加的脂肪如方 便面 等油 炸 食品,雖 含 量 高,但 脂 肪 容易 浸出,浸泡 后 回 流2 一3 小 時 即可 提取 完 全。
( 4 ) 實 驗過 程 中應 注 意 稱 量 的 重 要 性,天 平 室 環境條件除 滿足 一 般 要求外,相 對濕度 應控 制 在 4 5 % 以 下。在 此 條件 下 濾 紙包烘2 小 時 即 達 到恒 重 要 求,不 必復 烘。鋁杯 在 整個 抽提過 程 一 直 處 于1 3 5 ℃ 環 境中,只 需 烘 3 0 m i n 即 達 到恒 重 要 求。
與 國際 法 相 比,節 約 恒 重 所需大量 時 間,簡 化 實驗操作。
(5 ) 脂肪 測 定儀 同時 可 測定6 個 試樣,在1 個 工 作 日 內可 完 成 檢測,實 現脂 肪快 速、準 確 測定。能滿 足 日 常 生 產 和商貿 交 易 中對脂 肪 含 量 測 定 要 求。殘余 法在 一 套提 取 器 內可 同時放 置 多個 濾 紙 包,同時 測定多 個 樣 品,顯著 提 高工作效 率,節 省 水、電 和試 劑。殘余 法 對 大批 量 樣 品 脂肪檢 測 更能顯 現其 優 越性,如 糧 食、油 料 品 種 篩 選,市場商 品 質 量 普 查等 工 作中脂 肪 含量 測 定。
( 6 ) 國 標法 盡管費時 間,但 仍 是普遍使 用 方 法。三 種 方法相 互 驗證起到 日 常檢 測 質 量 的控制作 用。脂 肪 檢 驗要 求認真 細 致,一 旦忽 視某個細節,都會 造 成 實驗失敗。
