肉、魚、蛋及其制品含有豐富的蛋白質(zhì)等多種營養(yǎng)成分, 它們既是人類的高級食品, 又是細菌的良好培養(yǎng)基。 如果這些食品在加工、存放或運輸過程中被細菌污染, 再加上酶的作用, 其中的蛋白質(zhì)便分解產(chǎn)生氨和胺類物質(zhì), 而氨和胺類在堿性條件下均具有揮發(fā)性, 故稱為揮發(fā)性鹽基氮[ 1] 。 揮發(fā)性鹽基氮是肉、魚、蛋類中食品鮮度等級的重要指標。 而國標中常用半微量定氮法。 但該法蒸餾、定氮過程十分繁瑣, 反應(yīng)池蒸汽出口易堵塞, 引起倒吸, 而且每測定一個樣品需要用稀酸清洗反應(yīng)池。 我們在自動凱氏定氮儀測定食品中蛋白質(zhì)基礎(chǔ)上, 摸索出一套自動蒸餾、滴定及計算的新方法。

1 材料與方法

1 .1 儀器與試劑 ①2400 凱氏定氮儀(瑞典 FOSS 公司), 帶750ml 蒸餾瓶;②氧化鎂懸浮液(10 g/ L);③含溴甲酚綠和甲基紅指示劑的 1 %硼酸吸收液, 稱取 100 g 硼酸溶于 10 L 純水中,添加 1 g/ L 的溴甲酚綠乙醇溶液 100 ml 和 1 g/ L 甲基紅乙醇溶液 70 ml;④鹽酸標準溶液 0.1 mol/ L。

1.2 實驗方法

1.2 .1 原理 揮發(fā)性鹽基氮在弱酸性條件下被蒸餾出來, 硼酸溶液吸收, 用鹽酸標準溶液進行滴定。 根據(jù)消耗鹽酸標準溶液的用量, 求出樣品中揮發(fā)性鹽基氮的含量。

1.2.2 測定方法[ 2]

1.2.2 .1 樣品處理 準確稱取絞碎的肉類 10 g 于 750 ml 管中,加入 100 ml 純水, 浸泡 30 min 。

1.2 .2.2 儀器操作條件 receiver (30 ml);water (50 ml);alkall (0 ml);mode delay ;time 12 s;distillation volume;tubedrain no。

1 .2.2 .3 測定 在浸泡好的樣品瓶中加入 10 ml 氧化鎂懸浮液, 迅速放進自動定氮儀上, 關(guān)上安全門, 儀器自動蒸餾、吸收、滴定和計算。

2 結(jié)果

2 .1 加標回收實驗 揮發(fā)性鹽基氮所測定的動物食品中的蛋白質(zhì)在腐敗過程中經(jīng)分解所產(chǎn)生的氨及胺類等堿性含氮物, 使用硫酸胺作為檢驗蒸餾器回收率的標準試劑進行加標回收實驗, 回收率在 97 .9%～ 102.3%, 符合檢測要求。

2 .2 精密度實驗 取不同的肉類樣品, 分別平行測定 6 次, 測定結(jié)果的相對標準偏差在 2.5 ～ 5 .0 之間, 見表 1。

2 .3 不同方法的比較 對同一樣品, 分別采用本方法與半微量定氮法相比比較, 兩種方法結(jié)果經(jīng) t 檢驗, 測定結(jié)果差異無顯著性(P >0.05)

3 討論

肉類取樣量一般 10 g 左右, 較新鮮的的樣品可在 <20 g 左右, 適量的鹽酸滴定量能減少誤差。 冷凍的樣品必須在解凍后4 h 之內(nèi)打碎攪拌取樣分析。 臨蒸餾前應(yīng)迅速地加入氧化鎂混懸液 10 ml 進行分析。

鹽酸標準液的濃度選在0 .100 0 左右, 使凱氏定氮儀既適用蛋白質(zhì)的測定, 又適合揮發(fā)性鹽基氮的測定, 系統(tǒng)不必更換標準溶液濃度, 減少了操作和不必要的交叉污染。

采用自動定氮儀測定肉制品揮發(fā)性鹽基氮, 一份樣品大約需要 5 min, 適用大批量樣品的測定, 結(jié)果精密度高、準確性好、回收率高, 方法簡便、快速值得推廣使用。