索氏抽提法適用范圍較廣，可用于肉制品、豆制 品、谷物、堅(jiān)果、油炸果品、中西式糕點(diǎn)等樣品中粗脂 肪含量的測(cè)定。我們采用此法，在2005年3月參加了由 國(guó)家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委員會(huì)（CNAL）組織的能力驗(yàn)證考 核，按《CNAL T0186大豆中營(yíng)養(yǎng)成分檢測(cè)能力驗(yàn)證方 案》的要求（以下簡(jiǎn)稱《驗(yàn)證方案》），對(duì)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物 質(zhì)研究中心發(fā)放的考核樣品進(jìn)行分析測(cè)定工作。經(jīng)仔細(xì) 試驗(yàn)和研究索氏抽提法的全過程，針對(duì)有可能影響最終 檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度和重復(fù)性的問題，我們采取一些改進(jìn)技 術(shù)措施，完善實(shí)驗(yàn)操作，取得較好的效果。

1 索氏抽提法分析中存在的不明確之處

因《驗(yàn)證方案》對(duì)考核樣品的測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度有很 高要求，我們進(jìn)行了慎重的預(yù)實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā) 現(xiàn)，索氏抽提法中有多處列出的分析步驟，沒有規(guī)定具 體操作方式或相關(guān)參數(shù)，甚至有不妥之處（下文在括弧 內(nèi)注明存在的問題），實(shí)際操作中難于把握具體細(xì)節(jié)， 有一定的隨意性，對(duì)檢測(cè)結(jié)果有較大影響。 1.1 試樣處理 準(zhǔn)確稱取樣品2.00～5.00g，必要時(shí)（未注明何種情 況為必要）拌以海砂，全部移入濾紙筒內(nèi)（未注明制作 濾紙筒的具體要求和尺寸，應(yīng)該多大為適用）。 1.2 抽提取 將濾紙筒放入脂肪抽提器的抽提筒內(nèi)，連接已干燥 至恒重的接收瓶，由抽取器冷凝管上端加入（此操作法 不妥）無水乙醚或石油醚至瓶?jī)?nèi)容積的2/3處，于水浴

上加熱（導(dǎo)熱方式不妥及未注明加熱溫度），使乙醚或 石油醚不斷回流提取，回流速度為6～8次/h，一般需抽 提6h～12h。 1.3 稱量測(cè)定 取下接收瓶，回收乙醚或石油醚，待接收瓶?jī)?nèi)乙醚 剩1～2ml時(shí)在水浴上蒸干（仍為導(dǎo)熱方式不妥及未注明 加熱溫度），再于100±5℃干燥2h。放置于干燥器內(nèi)冷 卻0.5h后稱量。重復(fù)以上操作直至恒重。

2 實(shí)驗(yàn)技術(shù)研究及改進(jìn)

2.1 加入海砂的量與方法 加入海砂的目的是使樣品保持膨松狀，在抽提時(shí)不 結(jié)塊，使乙醚能夠順暢進(jìn)入樣品內(nèi)部與其充分接觸，提 高回流抽提量，并易于進(jìn)行下一步往濾紙筒轉(zhuǎn)移的操 作，適用對(duì)象為粉末狀樣品。本次大豆粉考核樣研磨得 較細(xì)，必須加入適量海砂混勻，保證轉(zhuǎn)移和抽提完全， 否則會(huì)出現(xiàn)測(cè)定結(jié)果偏低的可能性。經(jīng)試驗(yàn)加入量以與 樣品體積比例1：1為宜，可使大豆粉樣品疏松通透，操 作要點(diǎn)為加入時(shí)應(yīng)充分?jǐn)嚢杈鶆颉?

 2.2 濾紙筒的制作 濾紙筒制作尺寸主要考慮以下幾個(gè)因素：（1）濾 紙不宜過小。折疊成筒狀時(shí)重疊部分較少，抽提時(shí)樣品 容易從接頭處漏失。（2）濾紙不宜過大。折疊成濾紙 筒時(shí)會(huì)使重疊部分過多過厚，阻礙抽提液順暢流經(jīng)樣 品，降低抽提效率。（3）特別要注意與實(shí)驗(yàn)器皿尺寸 相匹配。濾紙筒的直徑應(yīng)與抽提瓶?jī)?nèi)徑一致，偏大則不易將濾紙筒放入抽提瓶，硬性推入可能造成濾紙筒破裂。 偏小則會(huì)使濾紙筒漂浮于抽提液中，隨抽提液升降，濾紙 筒浮于液面之上的部分，抽提效果將受影響。因此，我們 選擇Φ18cm定量濾紙制作濾紙筒，將下端向上折疊2cm。 既保證抽濾時(shí)速度適中樣品不損失，又使濾紙折疊成筒狀 時(shí)有足夠適宜的重疊部分，不會(huì)使樣品從接縫處漏出或者 阻礙抽提液滲透流通。操作時(shí)必須注意：樣品在倒入時(shí)不 得進(jìn)入重疊部分的外層。濾紙筒放入抽提瓶底，用潔凈玻 璃棒或吸管將濾紙筒上端輕輕壓下成封閉狀，但要注意不 要壓得太緊，高度與回流管（細(xì)管下沿）齊平。 

2.3 抽提劑乙醚的加入方法 本次實(shí)驗(yàn)采用無水乙醚為抽提劑，加入無水乙醚 時(shí)，不能按1.2的方法直接從冷凝器上端加入。這樣操作 加入的乙醚向下流淌速度太快，將順冷凝管直接沖滴到 濾紙筒上，會(huì)使樣品從濾紙筒中滲出，抽提瓶中出現(xiàn)混 濁。我們對(duì)此作了改進(jìn)，具體的做法是將乙醚直接倒入 接收瓶?jī)?nèi)至2/3處，避免了抽提劑直接沖擊包有樣品的 濾紙筒，從而減少樣品損失。 

2.4 水浴加熱的導(dǎo)熱方式及加熱溫度 我們通過對(duì)實(shí)驗(yàn)全過程的觀察分析，認(rèn)為采用常規(guī) 的水浴加熱方式是不妥當(dāng)?shù)摹Ｔ�因�(yàn)椋涸摲椒ǖ淖罱K測(cè)定 手段是對(duì)接收瓶恒重，稱量其增重（即樣品重量），精確 至萬分之一克。因此除樣品本身外，其它能使接收瓶改變 重量的因素均應(yīng)排除。而將接收瓶直接浸入恒溫?zé)崴�中�?難于避免水中雜質(zhì)結(jié)附于瓶底（如水垢等），特別是類似 本次實(shí)驗(yàn)這樣加熱時(shí)間長(zhǎng)的情況就更加嚴(yán)重。因此，我們 采用降低水浴鍋中的水位，將接收瓶架于水浴鍋墊圈上的 辦法，改為以蒸氣為熱媒介質(zhì)進(jìn)行加熱，確保接收瓶底不 接觸加熱水。為滿足乙醚不斷回流抽提（6～8次/h）的要 求，經(jīng)多次試驗(yàn)，水浴溫度控制在75～80℃為宜。 

2.5 其它注意事項(xiàng) （1）對(duì)于檢測(cè)質(zhì)量要求高的樣品，正式開始測(cè)定前 應(yīng)做好預(yù)實(shí)驗(yàn)，初步了解樣品中脂肪含量的范圍，估算適 合的取樣量，取樣量不宜太少，否則測(cè)定精密度較差。 （2）接收瓶中最終結(jié)果呈現(xiàn)的應(yīng)該是澄清透明的油 狀物，若是出現(xiàn)混濁狀或有少量沉淀物，都表明樣品有滲 漏現(xiàn)象。如果發(fā)生這種情況，必須重新進(jìn)行樣品的檢測(cè)。 （3）回流時(shí)間以有冷凝后的乙醚滴下開始記時(shí)， 全程共7.0h。 （4）恒重接收瓶、樣品時(shí)，控制干燥箱的溫度為 100±3℃，2h，在干燥器中冷卻0.5h后稱重。特別強(qiáng)調(diào) 每次稱量的時(shí)間間隔要控制準(zhǔn)確一致。（5）注意天平室的溫度、濕度在各次稱量時(shí)應(yīng)基 本保持一致，便于稱量達(dá)到恒重結(jié)果。 （6）在整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過程中，應(yīng)配戴一次性PVC 手套，避免手對(duì)接收瓶外壁的沾污，造成結(jié)果偏重，形 成正誤差。 （7）有條件時(shí)應(yīng)帶質(zhì)控樣同時(shí)分析，檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)的 系統(tǒng)誤差，保證測(cè)定準(zhǔn)確度。

3 考核樣檢測(cè)結(jié)果

按《驗(yàn)證方案》對(duì)考核樣品的測(cè)定要求，采用以上 改進(jìn)完善后的方法，測(cè)定CNAL T0186大豆考核樣中脂 肪含量，測(cè)定5個(gè)平行樣取平均值。數(shù)據(jù)準(zhǔn)確度高(︱Z︳ ≤ 2 )，精密度好（A樣：RSD＝3.64%；B樣：RSD＝ 0.78%），獲得了滿意的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果見表1

檢測(cè)完成后，及時(shí)整理了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，按時(shí)將全部資 料上報(bào)。根據(jù)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可委員會(huì)（CNAL）反饋的 考核評(píng)審結(jié)論，本次對(duì)考核樣檢測(cè)的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠，取 得滿意結(jié)果(見表2)。

4 結(jié)論

采用前述經(jīng)改進(jìn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，可以很好地完善索氏 抽提法，使實(shí)驗(yàn)過程更為科學(xué)合理，從而獲得高質(zhì)量的 檢測(cè)結(jié)果。