粗脂肪含量是糧食、油料、飼料等產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中重要的質(zhì)量 指標(biāo), 是評(píng)價(jià)產(chǎn)品品質(zhì)和組織生產(chǎn)的重要依據(jù)之一。國(guó)內(nèi)外測(cè) 定粗脂肪含量的方法有 10 余種之多, 索氏抽提法是目前應(yīng)用 最廣泛的測(cè)定方法, 是公認(rèn)的脂肪含量測(cè)定的經(jīng)典方法 。在實(shí) 際工作中, 此法存在的問(wèn)題主要是抽提時(shí)間過(guò)長(zhǎng)和抽提結(jié)束后 抽提瓶不易恒重。圍繞這些問(wèn)題, 對(duì)抽提過(guò)程和抽提前后采用 的處理手段進(jìn)行改進(jìn)。以國(guó)標(biāo)法為參照, 熱浸提-油重法和殘 余法為改進(jìn)方法, 對(duì)照比較這 3 種檢測(cè)方法的測(cè)定結(jié)果。 

1　原理 

經(jīng)典索氏提取法測(cè)定脂肪是將樣品放在抽提筒內(nèi)以水浴 蒸餾冷凝的乙醚進(jìn)行回流浸提, 一般要十幾個(gè)小時(shí)。熱浸提 油重法由于樣品處于高溫溶劑中, 分子運(yùn)動(dòng)加快, 使脂肪的浸 出速度加快, 大大縮短了浸提時(shí)間, 從而加快了測(cè)定速度。 一 般完成樣品的整個(gè)提取過(guò)程不到 2 h。鋁杯代替玻璃瓶, 電熱 板代替水浴加熱, 抽提杯容易稱恒重, 而且抽提杯不易被污染,操作簡(jiǎn)單。殘余法采用抽提過(guò)脂肪的殘余物的質(zhì)量計(jì)算脂肪 含量。較以前的殘?jiān)�法的改進(jìn)之處在于不需稱恒重紙袋質(zhì)量, 在電子天平上稱出試樣質(zhì)量, 抽提前后樣品的質(zhì)量差為浸出脂 肪的量。測(cè)得的結(jié)果為原樣脂肪含量, 不是干基脂肪含量, 與 國(guó)標(biāo)法測(cè)得的結(jié)果一致。 

2　檢測(cè)方法 

2. 1　試劑和儀器 分析純的無(wú)水乙醚或沸程為 30～ 60 的石油醚; 索氏脂肪 提取器; FOSS 2055 型脂肪測(cè)定儀, 電子天平。 

2. 2　式樣制備 選取具有代表性的樣品 200g, 粉碎后全部通過(guò) 60 目篩, 裝于密封容器中, 防止試樣成分發(fā)生變化。 

2. 3　分析步驟 

2. 3. 1　國(guó)標(biāo)法 　按 GB/T 5512 食品中脂肪的測(cè)定方法或 GB/T 6433 飼料粗脂肪測(cè)定方法進(jìn)行檢測(cè)。 為使抽提終點(diǎn)有 一量化的概念, 消除不同人員目測(cè)產(chǎn)生的差異, 同時(shí)避免檢查 抽提終點(diǎn)時(shí)乙醚大量揮發(fā)而損害檢驗(yàn)人員健康 。采取平行測(cè) 定 6 個(gè)樣品, 8 h 后取出 1 個(gè)抽提瓶, 以后每隔 2 h 取出 1 個(gè),直到樣品脂肪含量不再增加為止。 測(cè)出不同類別的樣品需要 的抽提時(shí)間, 可作為日常工作的參照, 也是改進(jìn)法確定實(shí)驗(yàn)條 件的依據(jù)之一。部分樣品測(cè)定脂肪需要的抽提時(shí)間見(jiàn)表 1。 

2. 3. 2　熱浸提-油重法　稱樣 1～ 5 g( M)于濾紙筒中, 烘干。 把濾紙筒放到脂肪測(cè)定儀中。鋁杯在( 105±2) ℃條件下恒重 ( M1) 。放到儀器加熱板上, 壓下儀器連接手柄, 使鋁杯與回流 器緊密連接。從加液孔加入乙醚 80 mL, 接通冷凝水。脂肪含 量設(shè)定儀器條件: 加熱溫度 135℃; 浸提時(shí)間 30～ 90 min, 淋洗 30 min, 試劑回收 10 min, 蒸干 5 min。取下鋁杯, ( 105±2) ℃ 烘箱中干燥30 min, 在干燥器中冷卻, 稱重( M2) 。脂肪含量= ( M1- M2) ×100/M 2. 3. 3　殘?jiān)�法　稱取式樣 2 g( M)( 準(zhǔn)確至0. 000 2 g), 用濾紙 包好, (105±2) ℃烘箱中干燥 3 h 取出, 在干燥器中冷卻, 稱重 ( M1) 。將樣包裝入索氏脂肪抽提器的抽提筒中, 再倒入無(wú)水 乙醚, 乙醚高度為完全浸泡樣包, 連接好儀器各部分, 浸泡至少 16 h。將浸泡后的無(wú)水乙醚放入抽提瓶中, 在抽提瓶中放入幾 粒玻璃球, 然后, 抽提筒中重新倒入無(wú)水乙醚, 使之完全浸泡樣 包, 連接好儀器各部分, 接通冷凝水, 在 60～ 75 ℃的水浴上加 熱, 使乙醚回流, 控制乙醚回流次數(shù)為每小時(shí) 8 次。一般抽提 6～ 8 h。抽提完畢, 取出樣包, 置樣包于通風(fēng)處, 使乙醚揮發(fā)。 將樣包放入(105±2) ℃烘箱中干燥 2 h, 取出, 在干燥器中冷 卻, 稱重(M2) 。脂肪含量=( M1- M2) ×100/M 

3　結(jié)果與分析 

3. 1　樣品脂肪含量 樣品選取脂肪含量高的花生、脂肪指標(biāo)含量中等的魚(yú)粉, 和脂肪含量較低的玉米, 采用熱浸提-油重法和殘?jiān)�法分別測(cè) 定, 結(jié)果見(jiàn)表 2。由表 2 中數(shù)據(jù)可以看出, 2 種測(cè)定方法的重現(xiàn) 性都比較好。

3. 2　不同方法測(cè)定的樣品脂肪含量 選取一組樣品, 分別用 3 種方法測(cè)定樣品脂肪含量, 取 5 次測(cè)定結(jié)果的平均值為最終結(jié)果, 進(jìn)行比較, 數(shù)據(jù)見(jiàn)表 3。 兩 種測(cè)定結(jié)果與國(guó)標(biāo)法相比無(wú)顯著性差異( P>0. 05) 。 

3. 3　熱浸提法和殘余法與其他實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果的比較 為確定 2 種檢測(cè)方法的有效性和可比性, 與其他實(shí)驗(yàn)室測(cè) 定結(jié)果進(jìn)行了比較, 結(jié)果見(jiàn)表 4。絕對(duì)差均小于 0. 5%, 相對(duì)偏 差最高為 3. 6%, 符合標(biāo)準(zhǔn) GB/T 6433-1994 和 GB/T 551285 不同實(shí)驗(yàn)室間重復(fù)性要求。

4　結(jié)論 　　國(guó)標(biāo)法、熱浸提-油重法和殘余法均具有好的重現(xiàn)性和準(zhǔn) 確度, 說(shuō)明 2 種改進(jìn)方法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠, 一定條件下 3 種 方法可以相互代替使用。 　　

熱浸提-油重法的優(yōu)勢(shì)在于, 利用脂肪測(cè)定儀使試樣浸入 沸騰的溶劑, 使脂肪迅速進(jìn)入溶劑中。樣品不同只需改變浸提 時(shí)間, 淋洗時(shí)間的改變沒(méi)有浸提時(shí)間的改變影響大。 30 min 的淋洗時(shí)間足以使脂肪完全洗脫。 　　

殘余法浸泡可利用晚上時(shí)間, 不加熱回流, 不必守護(hù), 不占 用工作日。回流時(shí)間可參照表 1 進(jìn)行調(diào)整 。方便面等油炸食 品中外加的脂肪, 雖然含量高, 但容易浸出, 浸泡后回流 2～ 3 h 方可提取完全。 　　

實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意稱量的重要性, 天平室的環(huán)境條件除滿 足一般要求外, 相對(duì)濕度應(yīng)控制在 45%以下。在此條件下用 濾紙包烘 2 h 過(guò)程, 即達(dá)到恒重要求, 不必復(fù)烘。鋁杯在整個(gè) 抽提過(guò)程中一直處于 135℃的環(huán)境中, 只需烘 30 min 即達(dá)到恒 重要求。與國(guó)標(biāo)法相比, 節(jié)約了恒重所需的大量時(shí)間, 簡(jiǎn)化了 實(shí)驗(yàn)操作步驟。 　　

脂肪測(cè)定儀可同時(shí)測(cè)定 6 個(gè)試樣, 在 1個(gè)工作日內(nèi)可完成 檢測(cè), 實(shí)現(xiàn)脂肪快速、準(zhǔn)確的測(cè)定, 能滿足日常生產(chǎn)和商貿(mào)交易 中關(guān)于脂肪含量測(cè)定的要求。殘余法在 1 套提取器內(nèi)可同時(shí) 放置多個(gè)濾紙包, 同時(shí)測(cè)定多個(gè)樣品, 顯著提高了工作效率, 節(jié) 省了水、電和試劑。殘余法在大批量的樣品脂肪檢測(cè)中更能顯 現(xiàn)其優(yōu)越性, 如糧食、油料品種的篩選, 市場(chǎng)商品質(zhì)量的普查等 工作中脂肪含量的測(cè)定。 　　

國(guó)標(biāo)法盡管費(fèi)時(shí)間, 仍是普遍使用的方法。3 種方法相互 驗(yàn)證, 起到日常檢測(cè)質(zhì)量的控制作用。 脂肪檢驗(yàn)要求認(rèn)真細(xì) 致, 一旦忽視了某一個(gè)細(xì)節(jié), 都會(huì)造成實(shí)驗(yàn)失敗。